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      技術(shù)文章
      
    選擇性氨基酸混合物（Dropout Supplement）
    
      點(diǎn)擊次數(shù)：5828 更新時(shí)間：2017-11-22
      
    
      
      
      酵母選擇營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基之：
       選擇性氨基酸混合物（Dropout Supplement, DO Supplement）
      (單缺，雙缺，三缺，四缺)
       
      背景描述：
      酵母菌的質(zhì)粒篩選通?；跔I養(yǎng)缺陷型突變菌株的使用而開展，這些菌株在缺乏某種特定培養(yǎng)基組分（比如氨基酸，嘌呤或嘧啶）的情況下無法生長。當(dāng)轉(zhuǎn)化含有突變基因的質(zhì)粒后使得陽性轉(zhuǎn)化克隆能夠在缺乏必需營養(yǎng)組分的培養(yǎng)基內(nèi)生長，正因如此，省卻成分培養(yǎng)基添加劑/選擇性氨基酸混合物（DO medium supplements）能用來篩選成功轉(zhuǎn)化的酵母培養(yǎng)物。
       
      選擇性氨基酸混合物/氨基酸缺失混合物（DO medium supplements）同義名：
      Yeast Media, Amino Acid Dropout Mixes
      Yeast Synthetic Drop-out Medium Supplements 
      Complete Supplement Mixture (CSM)
      Amino Acid Supplement (Drop-Out Mixture)
       
      酵母營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基：
      酵母選擇營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基（Synthetic Dropout Media, SD Media）多用來營養(yǎng)缺陷型標(biāo)記基因的篩選和酵母轉(zhuǎn)化。這類培養(yǎng)基的配制根據(jù)商業(yè)化產(chǎn)品的區(qū)別有兩種方式。
      *種方式：無氨基酸酵母氮源基礎(chǔ)+葡萄糖+選擇性氨基酸混合物（YNB without amino acids + glucose+ DO Supplement）
      第二種方式：酵母基本培養(yǎng)基SD Base+選擇性氨基酸混合物（Yeast Minimal Base——SD Base + DO Supplement）
      1. 商業(yè)化SD Base與YNB的差別在于前者已添加葡萄糖。
      2. 有研究顯示，葡萄糖與氨基酸一起高壓滅菌會(huì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，培養(yǎng)基會(huì)變色，由淺黃到深褐色不等，可能對細(xì)胞的生長產(chǎn)生一些影響，但一般情況下不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)。因此，很多實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過驗(yàn)證或通過對自身實(shí)驗(yàn)體系的評(píng)估，還是傾向用【第二種方式】來配制選擇性缺陷*培養(yǎng)基。
      3. 我司（懋康生物）建議客戶根據(jù)自身需求來選擇產(chǎn)品和配制培養(yǎng)基。
       
      酵母營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基工作原理：
      特異的酵母營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基用于選擇培養(yǎng)含特異載體的酵母或雜交篩選。其工作原理如下（以基于Matchmarker GAL4-based two hybrid assay系統(tǒng)用到的載體為例）：
      誘餌載體（pGBKT7-Bait）含合成色氨酸（Trp）的基因，誘捕載體（pGADT7-Prey）含合成亮氨酸（Leu）的基因。前者的親代酵母菌株（如Y2HGold）本身不含Trp基因，在Trp缺失的培養(yǎng)基上無法生長。當(dāng)誘餌載體（pGBKT7-Bait）成功轉(zhuǎn)入Y2HGold，其在Trp缺失的培養(yǎng)基【即SD-Trp單缺培養(yǎng)基】上就能正常生長。同理，后者的親代酵母菌株（如Y187）本身不含Leu基因，在Leu缺失的培養(yǎng)基上無法生長。但當(dāng)誘捕載體（pGADT7-Prey）成功轉(zhuǎn)入Y187，其在Leu缺失的培養(yǎng)基【即SD-Leu單缺培養(yǎng)基】上能正常生長。
       
      選擇性氨基酸混合物（DO medium supplements）類別和應(yīng)用：
      不管是*種方式還是第二種方式配制的酵母選擇營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基（SD Media）配制的關(guān)鍵在于選擇合適的選擇性/缺陷型氨基酸混合物（DO supplement）來配制特定的培養(yǎng)基，從而滿足特定的需求。如何選擇合適的選擇性氨基酸混合物，見表1。
      根據(jù)氨基酸缺失數(shù)目分為單缺氨基酸混合物（Single Dropout Supplements，SDO），雙缺氨基酸混合物（Double  Dropout Supplements，DDO），以此類推。
       
      主要應(yīng)用：
      1. 營養(yǎng)缺陷型表型的確認(rèn)
      2. 酵母轉(zhuǎn)化陽性菌株的篩選
      3. 酵母雙雜交篩選
      4. 酵母單雜交選擇
      表1. 選擇性氨基酸混合物（DO medium supplements）類別和應(yīng)用
      類型
      應(yīng)用
      名稱
      MKbio編號(hào)
      Clontech編號(hào)
      SDO（Single Dropout Supplements）（單缺）
      外源基因在酵母中的表達(dá)、異源基因功能互補(bǔ)、酵母單雜交系統(tǒng)和酵母雙雜交系統(tǒng)初始質(zhì)粒轉(zhuǎn)化
      DO Supplement -His
      MS6316-10G
      630415
      DO Supplement -Leu
      MS6317-10G
      630414
      DO Supplement -Trp
      MS6318-10G
      630413
      DO Supplement -Ura
      MS6319-10G
      630416
      DDO（Double  Dropout Supplements）
      配制酵母選擇營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基的氨基酸混合物（雙缺）
      外源基因在酵母中的表達(dá)、異源基因功能互補(bǔ)、酵母單雜交系統(tǒng)和酵母雙雜交系統(tǒng)初始質(zhì)粒轉(zhuǎn)化免疫共沉淀、Y187和AH109酵母交配實(shí)驗(yàn)、接合型二倍體篩選
      DO Supplement -His/-Leu
      MS6320-10G
      630418
      DO Supplement -His/-Ura
      MS6321-10G
      630422
      DO Supplement -Leu/-Trp
      MS6322-10G
      630417
      DO Supplement -Met/-Trp
      MS6323-10G
      630431
      DO Supplement -Trp/-Ura
      MS6324-10G
      630427
      DO Supplement -Trp/-His
      MS6325-10G
      /
      DO Supplement -Ura/-Leu
      MS6326-10G
      /
      TDO（Triple  Dropout Supplements）
      配制酵母選擇營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基的氨基酸混合物（三缺）
      外源基因在酵母中的表達(dá)、異源基因功能互補(bǔ)、酵母單雜交系統(tǒng)和酵母雙雜交系統(tǒng)報(bào)告基因檢測、Y187和AH109酵母交配實(shí)驗(yàn)后報(bào)告基因分析（His3，Ade2）
      DO Supplement -His/-Leu/-Trp
      MS6331-10G
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      DO Supplement -His/-Leu/-Ura
      MS6332-10G
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      DO Supplement -His/-Trp/-Ura
      MS6333-10G
      630424
      DO Supplement -Leu/-Met/-Trp
      MS6334-10G
      630430
      DO Supplement -Leu/-Trp/-Ura
      MS6335-10G
      630426
      QDO（Quadruple Dropout Supplements）
      配制酵母選擇營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)基的氨基酸混合物（四缺）
      酵母雙雜交系統(tǒng)和酵母三雜交系統(tǒng)報(bào)告基因檢測、Y187和AH109酵母交配實(shí)驗(yàn)后報(bào)告基因分析（His3,Ade2）
      DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp
      MS6341-10G
      630428
      DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp
      MS6342-10G
      630429
      DO Supplement -His/-Leu/-Trp/-Ura
      MS6343-10G
      630425
       
      選擇性氨基酸混合物（DO medium supplements）訂購信息：現(xiàn)貨供應(yīng)，性價(jià)比高，。
      品牌
      名稱
      貨號(hào)
      規(guī)格
      價(jià)格（元）
      對應(yīng)Clontech
      MKbio
      DO Supplement -His
      MS6316-10G
      10g
      418
      630415
      MKbio
      DO Supplement -Leu
      MS6317-10G
      10g
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      630414
      MKbio
      DO Supplement -Trp
      MS6318-10G
      10g
      418
      630413
      MKbio
      DO Supplement -Ura
      MS6319-10G
      10g
      418
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      MKbio
      DO Supplement -His/-Leu
      MS6320-10G
      10g
      418
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      MKbio
      DO Supplement -His/-Ura
      MS6321-10G
      10g
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      630422
      MKbio
      DO Supplement -Leu/-Trp
      MS6322-10G
      10g
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      630417
      MKbio
      DO Supplement -Met/-Trp
      MS6323-10G
      10g
      418
      630431
      MKbio
      DO Supplement -Trp/-Ura
      MS6324-10G
      10g
      418
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      MKbio
      DO Supplement -Trp/-His
      MS6325-10G
      10g
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      /
      MKbio
      DO Supplement -Ura/-Leu
      MS6326-10G
      10g
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      DO Supplement -His/-Leu/-Trp
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      10g
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      630419
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      DO Supplement -His/-Leu/-Ura
      MS6332-10G
      10g
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      MKbio
      DO Supplement -His/-Trp/-Ura
      MS6333-10G
      10g
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      MKbio
      DO Supplement -Leu/-Met/-Trp
      MS6334-10G
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      MKbio
      DO Supplement -Leu/-Trp/-Ura
      MS6335-10G
      10g
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      630426
      MKbio
      DO Supplement -Ade/-His/-Leu/-Trp
      MS6341-10G
      10g
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      630428
      MKbio
      DO Supplement -His/-Leu/-Met/-Trp
      MS6342-10G
      10g
      418
      630429
      MKbio
      DO Supplement -His/-Leu/-Trp/-Ura
      MS6343-10G
      10g
      418
      630425
      【重要消息】：
      1. 見我司（懋康生物）整理的酵母雙雜交（Yeast two-hybrid assays）產(chǎn)品專題，從酵母菌株、酵母質(zhì)粒、酵母培養(yǎng)基到篩選標(biāo)志（抗生素），。
      2. 見我司（懋康生物）的酵母雙雜交系列產(chǎn)品*活動(dòng)，屬于你的福利，當(dāng)然要享受起來。。
      3. 見我司（懋康生物）整理的無氨基酸酵母氮源基礎(chǔ)（BD Difco，YNB without amino acids）產(chǎn)品信息，。
       
      相關(guān)產(chǎn)品：產(chǎn)品具體信息。
      品牌
      名稱
      貨號(hào)
      規(guī)格
      價(jià)格（元）
      對應(yīng)Clontech
      MKbio
      YPD Agar Medium 
      MS6301-350G
      350g
      550
      630410
      MKbio
      YPD Medium 
      MS6302-250G
      250g
      438
      630409
      MKbio
      YPDA Agar Medium
      MS6303-350G
      350g
      550
      630465
      MKbio
      YPDA Medium 
      MS6304-250G
      250g
      438
      630464
      MKbio
      YNB Without Amino Acids
      MS6305-100G
      100g
      330
      291940（Difco）
      MKbio
      YNB Without Amino Acids 
      MS6305-500G
      500g
      1450
      291940（Difco）
      MKbio
      Minimal SD Agar Base 
      MS6311-467G
      467g
      1428
      630412
      MKbio
      Minimal SD Base 
      MS6312-267G
      267g
      768
      630411
      MKbio
      Minimal SD Agar Base Gal/Raf 
      MS6313-270G
      270g
      1428
      630421
      MKbio
      Minimal SD Base Gal/Raf 
      MS6314-185G
      185g
      988
      630420
      【特別提醒】：
      1. 我司（懋康生物）可根據(jù)需求定制只符合您的缺陷型氨基酸混合物，有求并有應(yīng)，詳情。
      2. 我司（懋康生物）提供預(yù)混好的酵母選擇營養(yǎng)缺陷完整培養(yǎng)基系列凍干粉，使用更加簡單快捷，詳情。
       
       — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
       
      上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供產(chǎn)品。
       
      
      
      
      
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