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      IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷

      IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷

      簡要描述:

      IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,誘導(dǎo)細菌lac或tac操縱子調(diào)控的基因轉(zhuǎn)錄,尤其是水解酶β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal)。一旦表達,β-gal水解β-半乳糖苷和乳糖為單糖。IPTG通常用于β-gal活性分析,當(dāng)含大腸桿菌來源lacZ基因的載體轉(zhuǎn)染進入細胞后,編碼表達β-gal,細胞裂解后,通過催化底物ONPG的顏色反應(yīng)即可定量分析活性。

      產(chǎn)品時間:2024-03-25

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      IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷/重組蛋白表達誘導(dǎo)物/啟動lacZ基因

       

      產(chǎn)品關(guān)鍵詞:

      IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷;X-gal 5--4--3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷;β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal);lac repressor 乳糖阻遏物;lacZ Operon lacZ操縱子;Blue-white Screening 藍白斑篩選;CAS NO.: 367-93-1

       

      基本描述:

      IPTG,英文全名Isopropyl-beta-D-thiogalactoside,中文全名異丙基-β-D-硫代半乳糖苷,CAS NO367-93-1,誘導(dǎo)細菌lactac操縱子調(diào)控的基因轉(zhuǎn)錄,尤其是水解酶β-半乳糖苷酶(β-galbeta-gal)。一旦表達,β-gal水解β-半乳糖苷和乳糖為單糖。IPTG通常用于β-gal活性分析,當(dāng)含大腸桿菌來源lacZ基因的載體轉(zhuǎn)染進入細胞后,編碼表達β-gal,細胞裂解后,通過催化底物ONPG的顏色反應(yīng)即可定量分析活性。IPTG也是硫代半乳糖苷轉(zhuǎn)乙?;傅牡孜?,文獻報道還能誘導(dǎo)合成細菌青霉素酶。體內(nèi)研究IPTG的一個重要優(yōu)勢在于,IPTG不會大腸桿菌所代謝,IPTG濃度和lac p/o控制基因表達都保持穩(wěn)定。

       

      IPTG誘導(dǎo)lacZ表達的作用機制:

       

      IPTG的主要生理功能:

      1)β-半乳糖苷酶(β-gal,beta-gal)活性檢測

      β-半乳糖苷酶(β-galactosidaseβ-gal)由大腸桿菌lacZ基因編碼,是zui常用的一種報告酶,用來研究哺乳動物細胞的基因表達,蛋白-蛋白相互作用,以及標(biāo)準(zhǔn)化轉(zhuǎn)染效率。

      檢測原理IPTG誘導(dǎo)lacZ基因表達β-半乳糖苷酶(β-gal),細胞裂解后,體系中加入無色的ONPG(鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷),被β-gal水解為鄰硝基苯酚(o-nitrophenol),生成黃色(420nm)。顏色反應(yīng)的強度與β-gal活性成正比

      2)藍白斑篩選(Blue-white screening

      IPTG普遍用在需要誘導(dǎo)β-gal活性的克隆步驟中,zui為常見的就是和X-gal聯(lián)合使用進行藍白斑克隆篩選,或與Magenta-gal聯(lián)合使用進行紅/白斑克隆篩選。

      作用機理: 當(dāng)目的基因插入載體lacZ基因,破壞β-gal表達并阻止其表達。細菌在含X-gal的培養(yǎng)基上生長,β-gal水解此底物生成一不可溶藍色產(chǎn)物,菌落呈藍色。若β-gal不能表達,細菌克隆則無法催化X-gal底物,菌落呈白色,以此區(qū)分轉(zhuǎn)化重組載體或非重組載體的克隆子。

      3)重組蛋白的誘導(dǎo)表達

      IPTG也可用于重組蛋白的誘導(dǎo)表達。在這些體系中,待研究蛋白在IPTG誘導(dǎo)型啟動子下游編碼。IPTG誘導(dǎo)待研究蛋白表達,對細胞裂解后,使用一系列合適方法來純化蛋白,如His-tagGST-tag純化系統(tǒng)(融合相應(yīng)標(biāo)簽的重組蛋白)。

       

      產(chǎn)品特性

      1)CAS NO367-93-1

      2)英文同義名:Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside; Isopropyl β-D-thiogalactoside; IPTG;

      3)中文同義名:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷;異丙基 β-D-1-硫代半乳糖吡喃糖苷;

      4)分子式:C9H18O5S

      5) 分子量:238.30 g/mol

      6)  純度:99%(基于干重,HPLC

      7)   外觀:白色結(jié)晶粉末

      8)   雜質(zhì):≤0.1% Dioxane(二氧六環(huán))

      9)   溶解性:溶于水、乙醇

      10)化學(xué)結(jié)構(gòu):

       

      使用方法【詳見maokangbio

      1. IPTG儲存液配制
      2. 藍白斑篩選方法
      3. IPTG誘導(dǎo)重組蛋白的表達

       

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      MF2002-5G

      IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷

      76455-82-8

      5g

      195

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      MF2002-10G

      IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷

      76455-82-8

      10g

      350

      現(xiàn)貨

      MF2002-100G

      IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷

      76455-82-8

      100g

      1800

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      MM2005-1G

      ONPG 鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷

      369-07-3

      1g

      115

      現(xiàn)貨

      MS5510-10G

      DL-Dithiothreitol (DTT) 二硫蘇糖醇

      3483-12-3

      10g

      380

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      MS0839-5G

      D-(-)-Arabinose D-(-)-阿拉伯糖

      10323-20-3

      5g

      70

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      MP1610-1ML

      廣譜型蛋白酶抑制劑混合物(不含EDTA,100× DMSO儲液)

      /

      1ml

      380

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      注意事項

      為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

       

       — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

       

      上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作,主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承以人為本,以誠為信、合同守信的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

       

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