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      5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物 克隆與表達分析

      5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物 克隆與表達分析

      簡要描述:

      5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物 克隆與表達分析,用于酵母反選是一種常用的分子遺傳篩選方法。酵母菌質粒清除、質粒穿梭、等位置換和雙雜交篩選都會用到5-FOA。

      產(chǎn)品時間:2017-09-02

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      5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸

       

      搜索關鍵詞:

      5-FOA 5-氟乳清酸;URA3基因 Orotine-5'-monophosphate (OMP) decarboxylase;Counter-selection agent 反向篩選劑;CAS220141-70-8;

       

      產(chǎn)品描述:

      5-氟乳清酸(5-Fluoroorotic Acid5-FOA)用于酵母反選是一種常用的分子遺傳篩選方法。酵母菌質粒清除、質粒穿梭、等位置換和雙雜交篩選都會用到5-FOA。5-FOA自身對酵母細胞無毒,但功能型URA3基因能編碼表達乳清酸核苷-5′-單磷酸脫羧酶(OMP脫羧酶),將其轉化為有毒形式(如5-氟尿嘧啶),從而使得酵母細胞無法生長。因此,在添加尿嘧啶的5-FOA培養(yǎng)基中,攜帶URA3突變基因的酵母菌能正常生長。5-FOA主要用于釀酒酵母Saccharomyces cerevisiaeURA3)的鑒定和篩選,雖然曾用于其他菌株,包括粟酒裂殖酵母Schizosaccharomyces pombeURA4 and URA5),白色念珠菌Candida albicansURA3)和大腸桿菌E. coli pyrF)。酵母雙雜交系統(tǒng)中5-FOA的使用允許構建激活結構域雜交文庫來鑒定蛋白-蛋白相互作用。

       

      產(chǎn)品應用:

      1. 檢測酵母URA3基因表達;

      2. 構建酵母雙雜交文庫;

      3. 其他酵母遺傳學領域包括基因替換,可移動遺傳因子分析和基因突變鑒定研究。

       

      重要參數(shù)

      1. CAS NO703-95-7, 220141-70-8, 207291-81-4

      2. 同義名:5-fluoro-2,6-dioxo-1,2,3,6-tetrahydropyrimidine-4-carboxylic acid; 5-Fluorouracil-4-carboxylic acid; 5-Fluoro orotic acid; 2,6-Dihydroxy-5-fluoropyrimidine-4-carboxylic acid;

      3. 純度:≥98%

      4. 外觀:類白色至淡黃色粉末

      5. 熔點:~258°C(高溫非常穩(wěn)定,如煮沸和高壓滅菌)

      6. 溶解性:溶于DMSO,微溶于水,乙醇,甲醇

       

      使用方法【詳見懋康整理內容】

      一、5-FOA培養(yǎng)基配置方法(以粉末形式)

      二、5-FOA培養(yǎng)基配置方法(以儲存液形式)

       

      常見問題(FAQs):

      Q1. 如何保存5-FOA?

      A1. 5-FOA粉末可置于4°C 短期保存,-20°C長期保存。根據(jù)產(chǎn)品特性溶解配置儲存液,需避光置于4°C 短期保存。小量分裝后-20°C長期保存,可穩(wěn)定保存6個月。

      Q2. 5-FOA選擇性培養(yǎng)基pH是多少?

      A2.大于pH 4.5條件下5-FOA選擇性被破壞,*的問題在于質子化形式的FOA會滲透進入細胞。一般情況標準配方配置的平板pH=2.8。在pH=66.25-FOA*無活性,pH =5.45-FOA活性很好,pH=4或更低時5-FOA活性達到100%。正常情況配置5-FOA培養(yǎng)基不用調pH。

      Q3. 預制的5-FOA選擇性平板能保存多久?

      A3. 絕大多數(shù)實驗室保存5-FOA預制平板數(shù)月(3-6個月)。有的實驗室數(shù)據(jù)顯示能放9個月和>12個月(4°C存放),圈上封口膜防止干燥。

      Q4. 5-FOA使用濃度?

      A4. FOA1mg/ml)在酵母分子遺傳學中常用作選擇性試劑;在Ura+細胞群體重篩選出Ura-細胞;篩選釀酒酵母菌乳清酸核苷-5′-單磷酸脫羧酶(OMP脫羧酶)突變株。FOA0.1mg/ml)用來正篩選尿嘧啶營養(yǎng)缺陷型的硫依賴型嗜熱古細菌(Sulfolobus acidocaldarius)。

       

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      5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸

      MF2521-1G

      1g

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      5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸

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       — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

       

       

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