Human DiI-Ox-LDL (Human DiI-Oxidized Low Density Lipoprotein)

人源紅色熒光標記氧化型低密度脂蛋白

想了解更多脂蛋白產(chǎn)品的背景知識，可見MKBio整理的技術文章：脂蛋白類型與作用機理。

想了解更多脂蛋白產(chǎn)品，可見MKBio整理的產(chǎn)品專題：脂蛋白產(chǎn)品專題。

想了解內(nèi)皮祖細胞（EPC）鑒定的雙標記方法，可見MKBio整理的產(chǎn)品專題：EPC雙標記鑒定產(chǎn)品專題。

搜索關鍵詞：

HDL；LDL；DiI-LDL；氧化修飾Ox-LDL；乙酰化修飾Ac-LDL；LDL receptor LDL受體；Cholesterol 膽gu醇；Cholesteryl ester (CE) 膽gu醇酯 ；Triglyceride (TG) 甘油三酯；Cardiovascular diseases 心血管疾??；Atherosclerosis (AS) 動脈粥樣硬化； 

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溫馨提示：由于脂蛋白的保存周期比較短，約6周。本司一般都是接到訂單后再生產(chǎn)，從而保證客戶拿到最長效期的產(chǎn)品。所以，我們貨期至少要2天以上。

基本描述：

低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein，簡稱為LDL）是血液中五種常見脂蛋白之一，由極低密度脂蛋白（VLDL）通過脂蛋白脂肪酶（LPL）的作用使其喪失部分甘油三酯轉(zhuǎn)化而來。LDL是主要的膽gu醇和膽gu醇酯轉(zhuǎn)運體，占血漿脂蛋白總量的一半以上。LDL通過受體介導的內(nèi)吞作用被肝臟和其他組織吸收。LDL適用于心血管研究和脂質(zhì)運輸研究，也適用于LDL代謝及其與心血管疾病的關聯(lián)性研究。還能用作細胞標志物和疾病標志物。

氧化的LDL（Oxidized LDL，Ox-LDL）是修飾LDL中的一種，還包括乙酰化LDL、以及丙二醛（MDA）、4-羥烯酸（4-HNE）直接結(jié)合的LDL，這些未經(jīng)氧化修飾，僅僅是經(jīng)一般化學修飾的LDL稱為衍化LDL。兩者都可被清道夫受體識別，誘導泡沫細胞的形成。但兩者之間也有些差異，主要表現(xiàn)在：1）細胞生理功能方面，Ox-LDL可誘發(fā)細胞毒性作用，影響花生四烯酸代謝，抑制膽gu醇酯化作用等，但衍化LDL無上述效應；2）Ox-LDL消耗LDL內(nèi)源性抗氧化物質(zhì)，使LDL上的維生suE含量下降，而MDA-LDL無上述效應；3）Ox-LDL涉及脂質(zhì)過氧化反應，LDL中的PUFAs被氧化。MDA對LDL修飾，是直接和ApoB-100結(jié)合成希夫氏堿，脂質(zhì)過氧化反應輕微；4）LDL的氧化修飾中，在氧化程度低時，ApoB降解；在氧化程度高時，ApoB又可發(fā)生再聚合。MDA-LDL的修飾中，ApoB無降解、聚合發(fā)生；5）Ox-LDL 的熒光峰波長為430nm，而MDA -LDL的熒光峰波長為460nm。

LDL氧化修飾的方式有很多種，常見的有：1）細胞介導的LDL氧化修飾，又稱為生物氧化修飾的LDL。如內(nèi)皮細胞，巨噬細胞，單核細胞都具有此功能；2）過度金屬離子介導的LDL氧化修飾，如Ca²⁺，Fe²⁺等；3）還有其他形式的氧化修飾，包括物理方法如紫外線，或過氧化物酶催化。

本品是由紅色熒光探針DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate）標記的人源氧化LDL（Human Ox-LDL）。DiI- Ox-LDL具有高受體結(jié)合力，且是一種廣為認知的膽gu醇遞呈增強劑?？赏ㄟ^熒光顯微鏡或流式細胞儀來鑒定和觀察細胞培養(yǎng)物內(nèi)的泡沫細胞。也可用來誘導巨噬細胞的泡沫細胞形成。本品為無菌包裝，可用PBS磷酸鹽緩沖液或細胞培養(yǎng)基直接稀釋使用即可。

產(chǎn)品特性：

1） 濃度：1.0-4.0 mg/ml
2） 外觀：乳狀液體
3） 緩沖液組分：PBS（含EDTA），pH7.2-7.4

保存與運輸方法

保存：2-8℃保存，收到貨后6周有效。避免強光直射，不可凍存！

運輸：冰袋運輸。

注意事項

1） 本品的稀釋工作液極不穩(wěn)定，建議現(xiàn)配現(xiàn)用； 

2） 本品長期貯存可能會有沉淀析出，屬于正?，F(xiàn)象，低速離心2 min去除沉淀后使用即可；

3） LDL與LDL受體的結(jié)合需要Ca²⁺和Mn²⁺的參與，過量EDTA的存在會抑制其結(jié)合；

4） 關于脂蛋白的更多信息，可見懋康生物整理的脂蛋白（Lipoproteins）產(chǎn)品專題。

5） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

操作步驟

1) 無菌條件下，將Human DiI-Ox-LDL用細胞培養(yǎng)基稀釋至20-40 µg/ml。

2) 加入活細胞內(nèi)，37℃培養(yǎng)3-6小時。

3) 孵育結(jié)束，吸去含Human DiI-Ox-LDL的培養(yǎng)基，并用無探針的培養(yǎng)基洗幾次。

4) 根據(jù)實驗需求用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測。

a) 熒光顯微鏡觀察

采用標準的羅丹明激發(fā)：發(fā)射濾光片（或建議使用波長為：Ex/Em=554nm/571nm）；若需要請使用含3%甲醛的PBS進行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因Dil易溶于有機溶劑。【注】需設陽性細胞以做對照。

b）  流式細胞分選

胰蛋白mei處理細胞或者加入EDTA制成單細胞懸液，選用合適的已標記純化細胞用作陰性和陽性對照，從而進行流式分選設門（gate）。（建議使用波長為554 nm；Em：571nm）。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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